Terapia genowa na niedobór odporności spowodowany niedoborem deaminazy adenozyny ad

Wcześniej opisywaliśmy dwóch pacjentów z niedoborem ADA, u których nie mieloablacyjne warunkowanie pozwoliło na istotną korektę zaburzeń metabolicznych i immunologicznych po roku od terapii genowej.18 Tutaj opisujemy długoterminowy wynik tych dwóch dzieci i uzyskamy ośmiu dodatkowych pacjentów, którzy byli leczono za pomocą warunkowania nie-mieloablacyjnego, a następnie wlewem autologicznych komórek CD34 + ze szpiku kostnego, które transdukowano wektorem wirusowym niosącym gen ADA. Metody
Pacjenci
Tabela 1. Tabela 1. Charakterystyka i leczenie pacjentów w badaniu. Pacjenci byli zapisywani od lipca 2000 r. Do września 2006 r. W jednym z trzech protokołów klinicznych 1-2 fazy: jeden został zatwierdzony przez Komisję ds. Etyki Szpitala Uniwersyteckiego Hadassah i izraelskie krajowe organy regulacyjne, a dwie zatwierdzone przez Komisję Etyki San Raffaele Instytutu Naukowego i włoskiego Krajowego Organy regulacyjne (tabela 1). Dzieci z SCID z powodu niedoboru ADA, którym brakowało zdrowego rodzeństwa identycznego z HLA, kwalifikowały się do rejestracji. Ponadto, pacjenci, którzy byli leczeni PEG-ADA przez co najmniej 6 miesięcy, kwalifikowali się w przypadku nieskuteczności, zdefiniowanej przez pomiary immunologiczne lub jako nietolerancję, reakcję alergiczną lub autoimmunizację.
Włoska Fundacja Telethon otrzymała od Europejskiej Agencji Leków oznaczenie leku sierocego dla komórek CD34 + transfekowanych wektorowo ADA (EMEA / OD / 053/05). Rodzice wszystkich pacjentów wyrazili pisemną zgodę na leczenie eksperymentalne. Dwa włoskie badania kliniczne zostały zarejestrowane w bazie danych o komórkach i terapii genowej włoskiego Istituto Superiore di Sanit., który od października 2002 r. Wymagał zgody pacjenta na leczenie.
Terapia genowa
Przed terapią genową wszczepiono centralny cewnik żylny, a próbki szpiku kostnego uzyskano i poddano krioprezerwacji do ewentualnego późniejszego użycia. W dniu 4 przed terapią genową, autologiczne próbki szpiku kostnego ponownie zebrano w znieczuleniu ogólnym; komórki jednojądrzaste izolowano za pomocą gradientów gęstości, a komórki CD34 + oczyszczano przy użyciu perełek immunomagnetycznych (CliniMACS, Miltenyi). Komórki CD34 + stymulowano cytokinami (ligand tyrozynowy 3 kinazy tyrozynowej, ligand KIT, trombopoetynę i interleukinę-3) i transdukowano wektorem retrowirusowym (GIADA1) w oparciu o wirusa białaczki mysiej Moloney niosącego ludzki gen ADA. 18 Wytwarzanie supernatantu Izolację komórek i transdukcję przeprowadzono w firmie MolMed zgodnie z aktualnymi Dobrymi Praktykami Wytwarzania. Niemieloablacyjne leczenie obejmujące podanie dożylne (lub doustne, w Patencie 2) 2 mg na kilogram na dzień busulfanu (Busilvex, Pierre Fabre) przeprowadzono w dniach 3 i 2 przed terapią genową. Terapia genowa polegała na infuzji komórek szpiku CD34 +, które zostały poddane transdukcji za pomocą wektora zawierającego ADA.
Badania laboratoryjne
Próbki krwi i szpiku pobierano od pacjentów z SCID z powodu niedoboru ADA, a próbki krwi pobrano od zdrowych dzieci i dorosłych jako kontrole, za zgodą komisji etyki Instytutu San Raffaele i komisji Hadassah University Hospital Ethics, zgodnie z normą etyczną procedury
[podobne: namiot magazynowy, rehabilitacja niemowląt, anatomia palpacyjna ]

Powiązane tematy z artykułem: anatomia palpacyjna namiot magazynowy rehabilitacja niemowląt